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金银花提取物中绿原酸含量的检测办法

编辑: 植物提取物 添加时间:2018-06-05 来源:金银花提取物

      意图树立金银花提取物中绿原酸含量的HPLC测定办法。办法国产C18柱(4.6mm×250mm,7μm);活动相为乙腈:0.4%磷酸(12∶88);检测波长为327nm;流速1ml·min-1;进样量10μl;柱温25℃。成果绿原酸在0.0716~0.6444μg范围内线性关系杰出,r=0.9996;均匀回收率99.99%,RSD=1.61%(n=6)。定论该办法简洁、快速、精确,可用于金银花提取物的含量测定及质量操控。
 
  金银花入药有两种方式,一是以全草直接投料,煎煮入药,即以煎煮液(即药材的提取液)作为半成品(中间体);另一种是先提取有用部位,而后以提取物投料,即以提取物作为中间体(原料)为了有用操控金银花提取物(中间体)的内涵质量,本试验参考了有关文献[2,3]及2005版《我国药典》[4]办法,选用高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸含量。
 
  1仪器与试药
 
  Agilent1100series高效液相色谱仪(G1322A排气阀,G1311A泵,G1316A柱温箱,G1314A紫外检测器),chemistation色谱工作站,KromasilC18色谱柱,超声提取器,绿原酸对照品(我国药品生物制品判定所,批号110753-200212),金银花提取物(本试验室克己),乙腈,磷酸均为剖析纯;水为双蒸水。
 
  2办法与成果[5]
 
  2.1剖析办法的树立——别离及检测条件的选择
 
  2.1.1色谱条件色谱柱为国产KromasilC18柱(250mm×4.6mm,7μm);柱温25℃;活动相为乙腈-0.4%磷酸(12∶88);流速为1ml·min-1;检测波长327nm。
 
  2.1.2pH值对峰形的影响绿原酸归于有机酸类物质,在HPLC测定时易发作前沿或拖尾峰,活动相参加酸能够改进这种现象。本试验比较了水、乙酸、磷酸对峰形的影响,当选用0.4%磷酸时,可得到较好的色谱峰形。
 
  2.1.3色谱体系适应性试验在选定条件下,绿原酸和样品中其他组分可基线别离,绿原酸与其相邻色谱峰的别离度大于1.5,理论塔板数(N)为5000以上。
 
  a-对照品b-供试品
 
  2.2对照品溶液的制备精细称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每毫升含35.8μg的溶液,即得。2.3供试品溶液的制备精细称取本提取物10mg,置100ml容量瓶中,双蒸水溶解,超声2min后,再用双蒸水定容至刻度,摇匀,过0.45μg微孔滤膜,取续滤液即得。
 
  2.4线性范围的考察及其规范曲线的制作精细汲取对照品溶液2,4,6,10,14,18μl,别离注入液相色谱仪。按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积积分值(A)对进样量进行回归,得回归曲线方程:Y=2468.4X-16.205,r=0.9996。成果标明,绿原酸在0.0716~0.6444μg范围内与峰面积呈杰出的线性关系。
 
  2.5精细度试验精细汲取对照品溶液10μl,按上述色谱条件重复进样6次,记载各组绿原酸峰面积值,成果均匀峰面积为:840.5,RSD为0.69%(n=6)。
 
  2.6安稳性试验取同一供试品溶液,别离于0,2,4,6,8h进样10μl,测得绿原酸的均匀峰面积值为:680.24,RSD为:0.38%(n=5),标明供试品溶液在8h内安稳。
 
  2.7重复性试验取同一批号(070204)样品6份,按含量测定办法测定,成果绿原酸均匀含量为28.01%,RSD为1.07%(n=6)。
 
  2.8加样回收率试验精细称取已知含量的金银花提取物6份,别离精细增加绿原酸对照品适量,按供试品溶液的办法制备,测定,核算回收率。
 
  2.9样品测定取3批样品,依照上述办法制备供试品溶液,进样10μl,依照已断定的色谱条件测定,按峰面积值用外标法核算样品中绿原酸的含量。
 
  3评论
 
  金银花提取物以有机酸为有用成分,本试验以绿原酸含量作为金银花提取物的质量操控目标,一起测定了3批金银花提取物中绿原酸的含量,经过核算,其含量均在20%以上。本文所树立的办法简洁、方便,重复性及安稳性均较好,可在实际出产中用于该提取物的质量操控。本文所做的工作为开发金银花的相关产品供给了质量监控办法。
——来源:植物提取物厂家
本文地址:/xinwenzixun/1020.html

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